血漿リポタンパク質(plasma lipoprotein)とは一定の割合の脂質とタンパク質からなる複合体で血清脂質の輸送を担っています。その構造の表面にはアポリポタンパク質があり、リポタンパク質の構造の安定化や、リポタンパク質代謝に関連する酵素の活性化、細胞表面にあるリポタンパク質受容体との結合など重要な役割を果たしています。アポリポタンパク質B-48(Apo B-48)は分子量264 000、構造的には、他の肝臓由来の血漿リポタンパク質で内因性脂質を輸送するVLDL、LDL、HDLに存在するアポリポタンパク質B100の48 %のアミノ酸配列を持っています。食物等に由来する外因性脂質を肝臓や末梢組織に輸送するリポタンパク質キロミクロン(Chylomicron、CM)は小腸で作られますがApo B-48はCMに特異的な構造タンパク質です。従ってApo B-48を測定することは摂食後のリポタンパク質の観察には最適です。また同一試料でLDL-、HDL-コレステロールとB-48を測定することにより、外因性コレステロール、内因性コレステロールの変化を解析できます(参考文献2)。心臓脈管系における粥状硬化症の原因の一つと見られているCMの残渣(CMレムナント)の評価にも役立つと考えられています。
参考文献
1:Determination of apolipoprotein B-48 in serum by a sandwich ELISA.
Kinoshita,M., Kojima,M., Matsushima,T., and Teramoto,T.
Clinica Chimica Acta, 351:115-120, 2005
2:Effects of intensive atorvastatin and rosuvastatin treatment on apolipoprorein B-48 and remnant
lipoprotein cholesterol levels.
Otokozawa,S.,Ai,M.,Van,Himbergen,T.,Asztalos,BF.,Tanaka,A.,Stein,EA.,Jones,PH.,Schaefer,EJ.
Atherosclerosis,205:197-201,2009
キットの特徴
● 短時間(全反応時間:2時間50分)で測定可能。 |
● 微量な検体で測定可能。 |
● 環境に優しい防腐剤を使用。 |
● 高い測定精度と再現性。 |
● 有効期限は製造日より12ヶ月。 |
キットの構成
構 成 品 | 状 態 | 容 量 |
(A) 抗体固相化 96 ウェルプレート | 洗浄後使用 | 96 wells(8×12)/1 枚 |
(B) 標準品(凍結乾燥) | 希釈後使用 | 128 ng/1 本 |
(C) 緩衝液 | そのまま使用 | 60 mL/1 本 |
(D) ビオチン結合抗 アポB-48抗体 | 希釈後使用 | 100 μL/1 本 |
(E) ペルオキシダーゼ・アビジン結合物 | 希釈後使用 | 100 μL/1 本 |
(F) 発色液(TMB) | そのまま使用 | 12 mL/1 本 |
(H) 反応停止液 ※取扱注意 | そのまま使用 | 12 mL/1 本 |
( I ) 濃縮洗浄液(10×) | 希釈後使用 | 100 mL/1 本 |
プレートシール | 4 枚 | |
取扱説明書 | 1 部 |
ヒトの血清・血漿(クエン酸Na使用不可)
50 μL/ウェル(希釈検体)
*検体希釈目安は100倍です。高値検体は200倍。
2.5~160 ng/mL(検量線範囲)
0.25~16.0 μg/mL(検体100倍希釈時)
精度試験(アッセイ内変動)
検体 | A | B | C |
1 | 2.99 | 18.8 | 87.1 |
2 | 2.89 | 19.8 | 88.4 |
3 | 3.22 | 18.2 | 89.8 |
4 | 3.12 | 17.9 | 91.2 |
5 | 2.95 | 18.5 | 92.1 |
mean | 3.03 | 18.6 | 89.7 |
SD | 0.134 | 0.730 | 2.03 |
CV(%) | 4.4 | 3.9 | 2.3 |
単位:ng/mL
再現性試験(アッセイ間変動)
測定日/検体 | D | E | F |
0日目 | 2.85 | 28.2 | 79.8 |
1日目 | 2.95 | 29.9 | 80.1 |
2日目 | 3.01 | 25.2 | 75.9 |
mean | 2.94 | 27.8 | 78.6 |
SD | 0.08 | 2.39 | 2.34 |
CV(%) | 2.8 | 8.6 | 3.0 |
単位:ng/mL n=2
添加回収試験
検体G
添加量 | 実測値 | 回収量 | 回収率(%) |
0 | 31.3 | – | – |
20.0 | 51.2 | 19.9 | 99.5 |
40.0 | 70.1 | 38.8 | 97.0 |
60.0 | 87.7 | 56.4 | 94.0 |
単位:ng/mL n=2
検体H
添加量 | 実測値 | 回収量 | 回収率(%) |
0 | 4.80 | – | – |
5.00 | 10.0 | 5.20 | 104 |
10.0 | 15.3 | 10.5 | 105 |
15.0 | 19.7 | 14.9 | 100 |
単位:ng/mL n=2
希釈直線性試験
4血清検体を連続的に希釈用緩衝液で3段階希釈し測定した結果、
直線回帰のR2は0.997から0.999でした。
臨床研究用測定試薬
脂質代謝研究分野
アポリポプロテイン
シバヤギコード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量 (希釈検体) |
希望納入価格 (消費税別) |
AKHB48J 633-10643 |
レビス Human Apo B-48 ELISA Kit | 2.5~160 ng/mL |
50 μL |
85,000円 |
■製品に関するお問い合わせはwksb-info@fujifilm.comまで