インスリンは膵臓のランゲルハンス島（膵島）のβ細胞から分泌されるホルモンで、分子量は約 5800、等 電点 5.4 付近の蛋白質です。
A6-A11、A7-B7、A20-B-19 で S-S 結合を形成し、酸性或いは Zn の存在しない中性水溶液では 2 量体 を形成しますが、中性で Zn 存在下では Zn2 個を含む 6 量体を形成します。 肝、筋肉、脂肪組織が主要な標的組織ですが、それぞれに次のような作用を示します。
肝 ： グリコーゲン合成促進、蛋白合成促進、脂肪酸合成促進、糖利用の促進、糖新生抑制。
筋肉 ： 糖、アミノ酸、K の細胞膜透過性増大、グリコーゲン合成促進、蛋白合成促進、蛋白分解抑制。
脂肪組織 ： グルコースの細胞膜透過性増大、脂肪酸合成促進。
インスリンは細胞内で１本鎖のプロインスリンの形で合成された後、S-S 結合が形成され、酵素分解による 活性化がおこって C-ペプチドとインスリンが分離します。
キットの特徴
| ● 短時間（全反応時間：2時間）で測定可能。 |
| ● ワイドレンジ39～20,000pg/mL |
| ● 微量な検体（標準操作法は 5 μL/well）で測定可能。 |
| ● 環境に優しい防腐剤を使用。 |
| ● 全ての試薬が溶液タイプで即座に使用可能。 |
| ● 高い測定精度と再現性。 |
| ● 簡便な操作で特別な前処理は不要。 |
| ● 有効期限は製造日より12ヶ月。 |
キットの構成
| 構 成 品 | 状 態 | 容 量 |
| (A) Anti-Insulin antibody coated plate 抗体固相化 96 ウェルプレート |
洗浄後使用 | 96 wells（8×12）／1 枚 |
| (B) Standard mouse/rat insulin solution (200 ng/mL) 標準マウス/ラットインスリン溶液（200 ng/mL） |
希釈後使用 | 50 μ L／1 本 |
| (C) Buffer solution 緩衝液 |
そのまま使用 | 60 mL／1 本 |
| (D) HRP–conjugated anti-insulin antibody ペルオキシダーゼ結合抗 インスリン抗体 |
希釈後使用 | 100 μ L／1 本 |
| (E) Luminescent Reagent 1 発光試薬1 |
(E)と(F)を1：1に 等量混合後使用 |
6 mL／1 本 |
| (F) Luminescent Reagent 2 発光試薬2 |
6 mL／1 本 | |
| ( I ) Wash stock solution (10×) 濃縮洗浄液（10×） |
希釈後使用 | 100 mL／1 本 |
| プレートシール | 1 枚 | |
| 取扱説明書 | 1 部 |
マウス検体インスリン測定結果
マウス CD-1(ICR)，雄，n=2, 単位：ng/mL
| 血清検体 | レビス インスリン マウス／ラット（発光系） |
レビス インスリン マウスT |
レビス インスリン マウス（Uタイプ） |
|
| 1 | 2.34 | 2.32 | 2.43 | |
| 2 | 1.11 | 1.80 | 1.89 | |
| 3 | 1.53 | 2.26 | 2.37 | |
マウス CD-1(ICR)，雄，n=2, 単位：ng/mL
| 血漿(EDTA)検体 | レビス インスリン マウス／ラット（発光系） |
レビス インスリン マウスT |
レビス インスリン マウス（Uタイプ） |
|
| 1 | 1.78 | 1.90 | 2.00 | |
| 2 | 2.87 | 3.46 | 3.63 | |
| 3 | 1.81 | 2.55 | 2.68 | |
マウス CD-1(ICR)，雄，n=2, 単位：ng/mL
| 血漿（ヘパリン）検体 | レビス インスリン マウス／ラット（発光系） |
レビス インスリン マウスT |
レビス インスリン マウス（Uタイプ） |
|
| 1 | 2.18 | 2.92 | 3.06 | |
| 2 | 1.34 | 1.94 | 2.03 | |
| 3 | 1.80 | 2.49 | 2.61 | |
ラット検体インスリン測定結果
ラット SD，雄，n=2, 単位：ng/mL
| 血清検体 | レビス インスリン マウス／ラット（発光系） |
レビス インスリン ラットT |
レビス インスリン ラット（U-Eタイプ） |
|
| 1 | 0.932 | 0.964 | 1.01 | |
| 2 | 1.71 | 1.47 | 1.54 | |
| 3 | 1.98 | 1.76 | 1.85 | |
ラット SD，雄，n=2, 単位：ng/mL
| 血漿(EDTA)検体 | レビス インスリン マウス／ラット（発光系） |
レビス インスリン ラットT |
レビス インスリン ラット（U-Eタイプ） |
|
| 1 | 1.99 | 2.10 | 2.20 | |
| 2 | 1.40 | 1.64 | 1.72 | |
| 3 | 1.77 | 1.95 | 2.05 | |
ラット SD，雄，n=2, 単位：ng/mL
| 血漿（ヘパリン）検体 | レビス インスリン マウス／ラット（発光系） |
レビス インスリン ラットT |
レビス インスリン ラット（U-Eタイプ） |
|
| 1 | 2.73 | 2.43 | 2.55 | |
| 2 | 1.99 | 2.21 | 2.32 | |
| 3 | 1.40 | 1.75 | 1.84 | |
培地を用いた添加回収・希釈直線性試験
未使用の培地にインスリンを添加し測定した結果、
| 培地 | 添加量 (ng/mL) | 測定値 (ng/mL) | 回収率(%) |
| D-MEM (High Glucose) 富士フイルム和光純薬 #048-30275 |
― | ND | ― |
| 0.313 | 0.322 | 103 | |
| 1.25 | 1.16 | 92.8 | |
| 2.50 | 2.42 | 96.8 | |
| 5.00 | 4.84 | 96.8 | |
| RPMI1640 富士フイルム和光純薬 ＃189-02025 |
― | ND | ― |
| 0.313 | 0.317 | 101 | |
| 1.25 | 1.28 | 102 | |
| 2.50 | 2.64 | 106 | |
| 5.00 | 5.00 | 100 |
マウスまたはラットの血清・血漿・培養上清・細胞抽出液
5 μ L/ウェル（標準操作法）
39～20,000 pg/mL（検量線範囲）
精度試験（アッセイ内変動）
| 検体 | ID1 | ID2 |
| mean | 5.31 | 0.795 |
| SD | 0.065 | 0.031 |
| CV(%) | 1.2 | 3.8 |
単位：ng/mL n=5
再現性試験（アッセイ間変動）
| 測定日/検体 | ID3 | ID4 | ID5 |
| 0日目 | 2.48 | 0.664 | 0.175 |
| 1日目 | 2.52 | 0.642 | 0.171 |
| 2日目 | 2.55 | 0.618 | 0.160 |
| 3日目 | 2.42 | 0.621 | 0.163 |
| mean | 2.49 | 0.636 | 0.167 |
| SD | 0.056 | 0.021 | 0.007 |
| CV(%) | 2.2 | 3.3 | 4.1 |
単位：ng/mL n=3
添加回収試験
検体:マウス血清
| 添加量 | 実測値 | 回収量 | 回収率(%) |
| 0 | 0.294 | – | – |
| 0.256 | 0.544 | 0.250 | 97.7 |
| 0.640 | 0.891 | 0.597 | 93.3 |
| 1.60 | 1.85 | 1.56 | 97.5 |
| 4.00 | 4.05 | 3.76 | 94.0 |
単位：ng/mL
検体：マウスEDTA血漿
| 添加量 | 実測値 | 回収量 | 回収率(%) |
| 0 | 0.346 | – | – |
| 0.256 | 0.592 | 0.246 | 96.1 |
| 0.640 | 0.949 | 0.603 | 94.2 |
| 1.60 | 1.85 | 1.50 | 93.8 |
| 4.00 | 4.26 | 3.91 | 97.8 |
単位：ng/mL
検体：マウスヘパリン血漿
| 添加量 | 実測値 | 回収量 | 回収率(%) |
| 0 | 0.265 | – | – |
| 0.256 | 0.521 | 0.256 | 100 |
| 0.640 | 0.879 | 0.614 | 95.9 |
| 1.60 | 1.81 | 1.55 | 96.9 |
| 4.00 | 4.26 | 4.00 | 100 |
希釈直線性試験
・ラット血清検体を連続的に希釈用緩衝液で3段階希釈し測定した結果、
直線回帰のR2は0.9912, 0.9998でした。
・ラット血漿(EDTA)検体を連続的に希釈用緩衝液で3段階希釈し測定した結果、
直線回帰のR2は0.9985, 0.9992でした。
・ラット血漿(ヘパリン)検体を連続的に希釈用緩衝液で3段階希釈し測定した結果、
直線回帰のR2は0.9963, 1でした。
非臨床研究用測定試薬
糖尿病・肥満研究分野
インスリン
| 旧コード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量 （希釈検体） |
希望納入価格 （消費税別） |
| AKRIN-011T 634-01481 |
レビス インスリン－マウス（Tタイプ） 標準的な測定範囲のタイプです． |
0.156～10 ng/mL | 10 μL | 48,000円 |
| AKRIN-011RU 639-23911 |
レビス インスリン－マウス（RTU） Ready to useタイプ．6濃度の標準品，標識抗体，アビジン溶液が希釈済みです．作業時間を短縮できます． |
100～12 000 pg/mL | 10 μL | 57,000円 |
| AKRIN-011H 630-10371 |
レビス インスリン－マウス（Hタイプ） 高濃度検体測定に向いています．検体の希釈の手間が省けます． |
0.5～100 ng/mL | 10 μL | 50,000円 |
| AKRIN-031 633-03411 |
レビス インスリン－マウス（Uタイプ） 高感度タイプです．絶食時等，低濃度検体の測定にご利用ください． |
39～2500 pg/mL | 5 μL | 65,000円 |
| AKRIN-011S 636-07281 |
レビス インスリン－マウス（Sタイプ） 共存するプロインスリンとの交差性を抑え，インスリンを特異的に測定できます． |
78～5000 pg/mL | 5 μL | 65,000円 |
| AKRIN-010T 637-01471 |
レビス インスリン－ラット（Tタイプ） 標準的な測定範囲のタイプです． |
0.156～10 ng/mL | 10 μL | 48,000円 |
| AKRIN-010RU 636-24141 |
レビス インスリン－ラット（RTU）
Ready to useタイプ．6濃度の標準品，標識抗体，アビジン溶液が希釈済みです．作業時間を短縮できます． |
100～12 000 pg/mL | 10 μL | 54,000円 |
| AKRIN-010H 633-10621 |
レビス インスリン－ラット（Hタイプ） 高濃度検体測定に向いています．検体の希釈の手間が省けます． |
0.5～100 ng/mL | 10 μL | 48,000円 |
| AKRIN-130 636-05581 |
レビス インスリン－ラット（U-Eタイプ） 高感度タイプです．絶食時等，低濃度検体の測定にご利用ください． |
39～2500 pg/mL | 10 μL | 65,000円 |
| AKRIN-010S 637-07191 |
レビス インスリン－ラット（Sタイプ） 共存するプロインスリンとの交差性を抑え，インスリンを特異的に測定できます． |
0.1～10 ng/mL | 10 μL | 82,000円 |
| AKRIN-012T 633-01451 |
レビス インスリンキット（イヌ用） 標準的な測定範囲のタイプです． |
0.188～12 ng/mL | 10 μL | 54,000円 |
| AKRIN-014T 634-02221 |
レビス インスリンキット（サル用T） 標準的な測定範囲のタイプです． |
0.156～10 ng/mL | 10 μL | 54,000円 |
| AKRIN-013T 630-01461 |
レビス インスリンキット（ブタ用） 標準的な測定範囲のタイプです． |
0.188～12 ng/mL | 10 μL | 54,000円 |
| ASIN-003 637-07113 |
ウサギインスリン標準溶液 別売りのレビス インスリン-ラット（Tタイプ）が必要です． |
26,000円 | ||
| ASIN-018 635-13523 |
ウシインスリン標準溶液 別売りのレビス インスリン-ラット（Tタイプ）が必要です． |
26,000円 | ||
| ASIN-001 630-07103 |
ハムスターインスリン標準溶液 別売りのレビス インスリン-ラット（Tタイプ）が必要です． |
26,000円 |