インスリンは膵臓のランゲルハンス島(膵島)のβ細胞から分泌されるホルモンで、分子量は約 5800、等 電点 5.4 付近の蛋白質です。
A6-A11、A7-B7、A20-B-19 で S-S 結合を形成し、酸性或いは Zn の存在しない中性水溶液では 2 量体 を形成しますが、中性で Zn 存在下では Zn2 個を含む 6 量体を形成します。 肝、筋肉、脂肪組織が主要な標的組織ですが、それぞれに次のような作用を示します。
肝 : グリコーゲン合成促進、蛋白合成促進、脂肪酸合成促進、糖利用の促進、糖新生抑制。
筋肉 : 糖、アミノ酸、K の細胞膜透過性増大、グリコーゲン合成促進、蛋白合成促進、蛋白分解抑制。
脂肪組織 : グルコースの細胞膜透過性増大、脂肪酸合成促進。
インスリンは細胞内で1本鎖のプロインスリンの形で合成された後、S-S 結合が形成され、酵素分解による 活性化がおこって C-ペプチドとインスリンが分離します。

 

 

キットの特徴

● 短時間(全反応時間:2時間)で測定可能。
● ワイドレンジ39~20,000pg/mL
● 微量な検体(標準操作法は 5 μL/well)で測定可能。
● 環境に優しい防腐剤を使用。
● 全ての試薬が溶液タイプで即座に使用可能。
● 高い測定精度と再現性。
● 簡便な操作で特別な前処理は不要。
● 有効期限は製造日より12ヶ月。

 

キットの構成

 

構 成 品 状 態 容 量
(A)  Anti-Insulin antibody coated plate
  抗体固相化 96 ウェルプレート
洗浄後使用 96 wells(8×12)/1 枚
(B)  Standard mouse/rat insulin solution (200 ng/mL)
        標準マウス/ラットインスリン溶液(200 ng/mL)
希釈後使用 50 μ L/1 本
(C)   Buffer solution
        緩衝液
そのまま使用 60 mL/1 本
(D)  HRP–conjugated anti-insulin antibody
        ペルオキシダーゼ結合抗 インスリン抗体
希釈後使用 100 μ L/1 本
(E)   Luminescent Reagent 1
        発光試薬1

(E)と(F)を1:1に

等量混合後使用

6 mL/1 本
(F)   Luminescent Reagent 2
        発光試薬2
6 mL/1 本
( I ) Wash stock solution (10×)
        濃縮洗浄液(10×)
希釈後使用 100 mL/1 本
プレートシール   1 枚
取扱説明書   1 部

 

マウス検体インスリン測定結果

マウス CD-1(ICR),雄,n=2, 単位:ng/mL

血清検体 レビス インスリン
マウス/ラット(発光系)
レビス インスリン
マウスT
レビス インスリン
マウス(Uタイプ)
1 2.34 2.32 2.43
2 1.11 1.80 1.89
3 1.53 2.26 2.37

 

マウス CD-1(ICR),雄,n=2, 単位:ng/mL

血漿(EDTA)検体 レビス インスリン
マウス/ラット(発光系)
レビス インスリン
マウスT
レビス インスリン
マウス(Uタイプ)
1 1.78 1.90 2.00
2 2.87 3.46 3.63
3 1.81 2.55 2.68

 

マウス CD-1(ICR),雄,n=2, 単位:ng/mL

血漿(ヘパリン)検体 レビス インスリン
マウス/ラット(発光系)
レビス インスリン
マウスT
レビス インスリン
マウス(Uタイプ)
1 2.18 2.92 3.06
2 1.34 1.94 2.03
3 1.80 2.49 2.61

 

ラット検体インスリン測定結果

ラット SD,雄,n=2, 単位:ng/mL

血清検体 レビス インスリン
マウス/ラット(発光系)
レビス インスリン
ラットT
レビス インスリン
ラット(U-Eタイプ)
1 0.932 0.964 1.01
2 1.71 1.47 1.54
3 1.98 1.76 1.85

 

ラット SD,雄,n=2, 単位:ng/mL

血漿(EDTA)検体 レビス インスリン
マウス/ラット(発光系)
レビス インスリン
ラットT
レビス インスリン
ラット(U-Eタイプ)
1 1.99 2.10 2.20
2 1.40 1.64 1.72
3 1.77 1.95 2.05

 

ラット SD,雄,n=2, 単位:ng/mL

血漿(ヘパリン)検体 レビス インスリン
マウス/ラット(発光系)
レビス インスリン
ラットT
レビス インスリン
ラット(U-Eタイプ)
1 2.73 2.43 2.55
2 1.99 2.21 2.32
3 1.40 1.75 1.84

 

培地を用いた添加回収・希釈直線性試験

未使用の培地にインスリンを添加し測定した結果、

培地 添加量 (ng/mL) 測定値 (ng/mL) 回収率(%)
D-MEM

(High Glucose)

富士フイルム和光純薬

#048-30275
ND
0.313 0.322 103
1.25 1.16 92.8
2.50 2.42 96.8
5.00 4.84 96.8
RPMI1640
富士フイルム和光純薬
#189-02025
ND
0.313 0.317 101
1.25 1.28 102
2.50 2.64 106
5.00 5.00 100

 

マウスまたはラットの血清・血漿・培養上清・細胞抽出液

5 μ L/ウェル(標準操作法)

 

39~20,000 pg/mL(検量線範囲)

精度試験(アッセイ内変動)

検体 ID1 ID2
mean 5.31 0.795
SD 0.065 0.031
CV(%) 1.2 3.8

単位:ng/mL n=5

再現性試験(アッセイ間変動)

測定日/検体 ID3 ID4 ID5
0日目 2.48 0.664 0.175
1日目 2.52 0.642 0.171
2日目 2.55 0.618 0.160
3日目 2.42 0.621 0.163
mean 2.49 0.636 0.167
SD 0.056 0.021 0.007
CV(%) 2.2 3.3 4.1

単位:ng/mL n=3

添加回収試験

検体:マウス血清

添加量 実測値 回収量 回収率(%)
0 0.294
0.256 0.544 0.250 97.7
0.640 0.891 0.597 93.3
1.60 1.85 1.56 97.5
4.00 4.05 3.76 94.0

単位:ng/mL

検体:マウスEDTA血漿

添加量 実測値 回収量 回収率(%)
0 0.346
0.256 0.592 0.246 96.1
0.640 0.949 0.603 94.2
1.60 1.85 1.50 93.8
4.00 4.26 3.91 97.8

単位:ng/mL

検体:マウスヘパリン血漿

添加量 実測値 回収量 回収率(%)
0 0.265
0.256 0.521 0.256 100
0.640 0.879 0.614 95.9
1.60 1.81 1.55 96.9
4.00 4.26 4.00 100

希釈直線性試験

・ラット血清検体を連続的に希釈用緩衝液で3段階希釈し測定した結果、
 直線回帰のR2は0.9912, 0.9998でした。

・ラット血漿(EDTA)検体を連続的に希釈用緩衝液で3段階希釈し測定した結果、
 直線回帰のR2は0.9985, 0.9992でした。

・ラット血漿(ヘパリン)検体を連続的に希釈用緩衝液で3段階希釈し測定した結果、
 直線回帰のR2は0.9963, 1でした。

 

非臨床研究用測定試薬

糖尿病・肥満研究分野

インスリン

シバヤギコード
和光コード
品名 検量線範囲 検体量
(希釈検体)
希望納入価格
(消費税別)
AKRIN-011T
634-01481
レビス インスリン-マウス(Tタイプ)
標準的な測定範囲のタイプです.
0.156~10 ng/mL 10 μL 48,000円
AKRIN-011RU
639-23911
レビス インスリン-マウス(RTU)
Ready to useタイプ.6濃度の標準品,標識抗体,アビジン溶液が希釈済みです.作業時間を短縮できます.
100~12 000 pg/mL 10 μL 55,000円
AKRIN-011H
630-10371
レビス インスリン-マウス(Hタイプ)
高濃度検体測定に向いています.検体の希釈の手間が省けます.
0.5~100 ng/mL 10 μL 48,000円
AKRIN-031
633-03411
レビス インスリン-マウス(Uタイプ)
高感度タイプです.絶食時等,低濃度検体の測定にご利用ください.
39~2500 pg/mL 5 μL 62,000円
AKRIN-011S
636-07281
レビス インスリン-マウス(Sタイプ)
共存するプロインスリンとの交差性を抑え,インスリンを特異的に測定できます.
78~5000 pg/mL 5 μL 62,000円
AKRIN-010T
637-01471
レビス インスリン-ラット(Tタイプ)
標準的な測定範囲のタイプです.
0.156~10 ng/mL 10 μL 45,000円
AKRIN-010RU
636-24141
レビス インスリン-ラット(RTU)

Ready to useタイプ.6濃度の標準品,標識抗体,アビジン溶液が希釈済みです.作業時間を短縮できます.

100~12 000 pg/mL 10 μL 52,000円
AKRIN-010H
633-10621
レビス インスリン-ラット(Hタイプ)
高濃度検体測定に向いています.検体の希釈の手間が省けます.
0.5~100 ng/mL 10 μL 45,000円
AKRIN-130
636-05581
レビス インスリン-ラット(U-Eタイプ)
高感度タイプです.絶食時等,低濃度検体の測定にご利用ください.
39~2500 pg/mL 10 μL 62,000円
AKRIN-010S
637-07191
レビス インスリン-ラット(Sタイプ)
共存するプロインスリンとの交差性を抑え,インスリンを特異的に測定できます.
0.1~10 ng/mL 10 μL 80,000円
AKRIN-012T
633-01451
レビス インスリンキット(イヌ用)
標準的な測定範囲のタイプです.
0.188~12 ng/mL 10 μL 51,000円
AKRIN-014T
634-02221
レビス インスリンキット(サル用T)
標準的な測定範囲のタイプです.
0.156~10 ng/mL 10 μL 51,000円
AKRIN-013T
630-01461
レビス インスリンキット(ブタ用)
標準的な測定範囲のタイプです.
0.188~12 ng/mL 10 μL 51,000円
ASIN-003
637-07113
ウサギインスリン標準溶液
別売りのレビス インスリン-ラット(Tタイプ)が必要です.
    25,000円
ASIN-018
635-13523
ウシインスリン標準溶液
別売りのレビス インスリン-ラット(Tタイプ)が必要です.
    25,000円
ASIN-001
630-07103
ハムスターインスリン標準溶液
別売りのレビス インスリン-ラット(Tタイプ)が必要です.
    25,000円

 

■製品に関するお問い合わせはwksb-info@fujifilm.comまで