LHは下垂体前葉(腺下垂体)の好塩基性性腺刺激ホルモン産生細胞(ゴナドトローフ)でFSHと共に産生、貯蔵され、視床下部ホルモンLHRHの刺激で分泌されます。精巣にもLH様の物質が存在するという報告があります。動物種における分布は魚類-哺乳類の全脊椎動物に及びます。ラット下垂体でのLHの含量は、雄では6~7 μg/gland、雌では3~4 μg/gland(NIH-LH1 S1 換算)とオスのほうが多く、雌では性周期に伴い変動します。
LHは分子量:約 29 000 の糖蛋白質で、TSH、FSHと共通のα-サブユニットと、LH特有のβ-サブユニットからなるヘテロダイマーです。
LHの標的器官は、雌では卵胞の成熟顆粒膜細胞で、FSHと協力して卵胞の成熟とエストロゲン産生、排卵を誘発し、排卵後黄体化した後はプロゲステロン産生分泌を促進します。雄では精巣の間質細胞(Leydig 細胞)でアンドロゲン産生分泌促進、アンドロゲンを介し2次的に精子形成促進に関与します。受容体は膜7回貫通-G蛋白共役型PKA系です。
従ってLHが不足すると性ステロイド分泌低下、間質細胞萎縮、排卵黄体化停止などが起こり、過剰状態では精巣間質細胞肥大とそれに続く萎縮、エストロゲン、アンドロゲンの分泌増大、早発過排、性成熟促進等が起こります。
LHの分泌はGnRH (LHRH)によって直接的に促進され、生理状態としては血中性ステロイドの低下(間接、直接)、性周期による変動(特に排卵前期)、更年期-閉経後に分泌は増大します。
男性でも加齢によって増加します。発情前期に大量に分泌されるエストロゲンは、ポジティブフィードバックによりLHRHを介してLHの一過性大量分泌(LHサージ)を引き起こし、排卵を誘起します。
LHの分泌は血中性ステロイドの増加(間接、直接)、オピオイドペプチド特にβ-エンドルフィン、幼小児期、妊娠時、産褥期などで抑制されます。
レビス LH-ラット使用 単位 :ng/mL, 2重測定 レビス LH-ラット使用 単位 :ng/mL, 2重測定 レビス LH-ラット使用 Proestrus/19:00-20:00採血,7匹 Diestrus/15:00-16:00採血,4匹 Diestrus/19:00-20:00採血,3匹 ラット血清・血漿 ※検体は(G)検体希釈用緩衝液で2倍に希釈し、撹拌後室温で10分間静置、(C)測定用緩衝液でさらに2.5倍希釈した希釈液を測定に使用します(最終希釈倍率5倍)。 0.313~10 ng/mL(検量線範囲) 単位:ng/mL, n=8 単位:ng/mL, n=4 検体C 単位:ng/mL, n=2 検体D 単位:pg/mL, n=2 2血清検体を連続的に希釈用緩衝液で3段階希釈し測定した結果、直線回帰のR2は0.999でした。 AKRTS-010S2 ■製品に関するお問い合わせはwksb-info@fujifilm.comまでキットの特徴
● 短時間(全反応時間:3時間50分)で測定可能。
● 微量な検体(標準操作法は 10 μL)で測定可能。
● 環境に優しい防腐剤を使用。
● 全ての試薬が溶液タイプで即座に使用可能。
● 高い測定精度と再現性。
キットの構成
構 成 品
状 態
容 量
(A) 抗体固相化 96 ウエルプレート
洗浄後使用
96 wells(8×12)/1 枚
(B) 標準溶液(100 ng/mL)
希釈後使用
200 μL/1 本
(C) 測定用緩衝液
そのまま使用
60 mL/1 本
(D) ビオチン結合抗LH抗体
希釈後使用
100 μL/1 本
(E) ペルオキシダーゼ・アビジン結合物
希釈後使用
100 μL/1 本
(F) 発色液(TMB)
そのまま使用
12 mL/1 本
(G) 検体希釈用緩衝液
そのまま使用
12 mL/1 本
(H) 反応停止液(1M H2SO4)※取扱注意
そのまま使用
12 mL/1 本
( I ) 濃縮洗浄液(10×)
希釈後使用
100 mL/1 本
プレートシール
4 枚
取扱説明書
1 部
ラット検体LH測定結果
CD(SD), 8週齢, メス
Sample ID
LH測定値
1
2.81
2
3.24
3
4.33
4
0.998
5
1.21
6
0.925
7
1.21
8
1.12
9
1.53
mean
1.93
SD
1.22
検体 :血清
採血時の絶食:無し
麻酔 :バルビツール系ラット検体LH測定結果
CD(SD), 7週齢, オス
Sample ID
LH測定値
1
1.72
2
1.17
3
2.05
4
1.72
5
4.31
mean
2.19
SD
1.22
検体 :血清
採血時の絶食:あり
麻酔 :イソフルラン吸入麻酔ラット検体LH測定結果
Wister-Imamichi Rat, 8週齢, メス,
Proestrus/15:00-16:00採血,5匹
LH測定値
mean
18.5
SE
1.99
LH測定値
mean
7.77
SE
1.97
LH測定値
mean
3.06
SE
0.81
LH測定値
mean
1.23
SE
0.37
単位 :ng/mL, 2重測定
検体 :血清
麻酔 :無し
10 μL/well(標準操作法)
最終希釈倍率の限界は2.5倍になります。ただし、ウエルの総量は緩衝液で調整し50 μLとしてください。
※抗凝固剤はEDTA-2Na、1 mg/mL(最終濃度)をお薦めします。ヘパリンNa血漿の使用はできません。
1.565~50 ng/mL(検体量10 μLの時)精度試験(アッセイ内変動)
検体
A
B
1
8.74
1.15
2
8.78
1.03
3
8.79
1.07
4
8.68
1.06
5
8.03
1.03
6
8.27
1.13
7
7.94
1.07
8
7.97
1.05
mean
8.40
1.07
SD
0.39
0.04
CV(%)
4.6
3.9
再現性試験(アッセイ間変動)
測定日/検体
E
F
G
0日目
5.01
1.25
0.328
1日目
5.01
1.24
0.329
2日目
5.00
1.27
0.347
3日目
5.00
1.28
0.337
mean
5.00
1.26
0.335
SD
0.0019
0.016
0.0088
CV(%)
0.038
1.3
2.6
添加回収試験
添加量
実測値
回収量
回収率(%)
0.00
1.29
–
–
0.584
1.89
0.601
103
1.17
2.48
1.19
102
1.75
3.01
1.73
98.5
添加量
実測値
回収量
回収率(%)
0.00
2.23
–
–
1.36
3.59
1.35
100
3.39
5.60
3.36
99.2
4.07
6.21
3.97
97.7
希釈直線性試験
下垂体内分泌
シバヤギコード
和光コード品名
検量線範囲
検体量
希望納入価格
(消費税別)
AKRGH-010
635-13741レビス GH-ラット
0.0313~2 ng/mL
5~25 μL
60,000円
AKRLH-010S
636-23921レビス LH-ラット(Sタイプ)
0.313~10 ng/mL
10~20 μL
60,000円
639-31721レビス TSH-ラット(SⅡタイプ)
0.184~18.0 ng/mL
~20 μL
60,000円