血清中のコレステロール濃度は、肝及び腸管におけるコレステロールの生成・吸収・異化や血中リポタンパク質代謝と密接に関係しています。
本品は、N-エチル-N-(2-ヒドロキシ-3-スルホプロピル)- 3, 5-ジメトキシアニリンナトリウム(DAOS)を利用した青色発色系の酵素法試薬です。
マイクロプレート法により、マウス血清中の総コレステロールの測定に用いることができます。
用手法での測定も可能であり、また、ヒト血清中の総コレステロールの定量を行うこともできます。
キットの構成
構 成 品 | 容 量 | |
(1) 緩衝液 50 mmol/L MES | 150 mL/1 本 | |
(2) 発色剤 | 150 mL用/1 本 |
|
溶解時 | ||
コレステロールエステラーゼ | 1.6 units/mL | |
コレステロールオキシダーゼ | 0.31 units/mL | |
ペルオキシダーゼ(HRP) | 5.2 units/mL | |
DAOS | 0.95 mmol/L | |
4-アミノアンチピリン | 0.19 mmol/L | |
アスコルビン酸オキシダーゼ | 4.4 units/mL | |
(3) 標準液 コレステロール 200 mg/dL | 5 mL/1 本 |
※マイクロプレート法の場合、測定回数は500回、用手法の場合、測定回数は50回
測定原理
検体に発色試薬を作用させると、検体中のコレステロールエステル類は、コレステロールエステラーゼにより遊離のコレステロールと脂肪酸に分解します。生成したコレステロールは、既存の遊離型コレステロールと共にコレステロールオキシダーゼにより酸化し、同時に過酸化水素を生じます。生成した過酸化水素は、ペルオキシダーゼ(HRP)の作用によりDAOS と4-アミノアンチピリンを定量的に酸化縮合させ、青色色素を生じさせます。この青色色素の吸光度を測定することにより、検体中の総コレステロール濃度を求めます。
全血/血清/血漿検体
・ 採取後の検体は速やかに測定してください。
・ 溶血はわずかに正誤差を与えます。
・アルコルビン酸、ビリルビンは測定値にほとんど影響を与えません。
測定範囲:50~592.2 mg/dL
●感度
・ 精製水を試料として測定した場合の吸光度は、0.11 以下です。
・ 特定濃度の基準液(コレステロール 200 mg/dL)を試料として測定した場合の吸光度は、0.13 ~ 0.65 です。
●特異性
・ 既知濃度の管理用血清を測定するとき、既知濃度の± 10 %以内にあります。
精度試験(アッセイ内変動)
ヒト血清検体 | 1 | 2 |
1 | 169.8 | 81.3 |
2 | 172.8 | 86.6 |
3 | 176.3 | 90.5 |
4 | 183.8 | 86.8 |
5 | 178.2 | 84.1 |
6 |
174.6 | 88.1 |
mean | 175.9 | 86.2 |
SD | 4.8 | 3.2 |
CV(%) | 2.7 | 3.7 |
マウス血清検体 | 1 | 2 |
1 | 146.3 | 97.3 |
2 | 143.1 | 95.9 |
3 | 139.5 | 92.4 |
4 | 138.8 | 85.8 |
5 | 137.4 | 90.3 |
6 |
139.8 | 86.6 |
mean | 140.8 | 91.4 |
SD | 3.3 | 4.7 |
CV(%) | 2.3 | 5.2 |
ラット血清検体 | 1 | 2 |
1 | 134.9 | 78.9 |
2 | 135.0 | 75.3 |
3 | 140.1 | 74.6 |
4 | 132.3 | 70.0 |
5 | 130.9 | 76.7 |
6 |
133.7 | 77.7 |
mean | 134.5 | 75.5 |
SD | 3.2 | 3.1 |
CV(%) | 2.4 | 4.2 |
単位:mg/dL
再現性試験(アッセイ間変動)
ヒト血清検体
測定日/検体 | 3 | 4 | 5 |
0日目 | 371.1 | 173.8 | 79.8 |
1日目 | 390.5 | 181.0 | 81.4 |
2日目 | 380.4 | 176.9 | 79.0 |
3日目 | 385.8 | 180.2 | 85.2 |
mean | 381.9 | 178.0 | 81.3 |
CV(%) | 1.9 | 1.6 | 3.0 |
マウス血清検体
測定日/検体 | 3 | 4 | 5 |
0日目 | 287.6 | 139.7 | 89.1 |
1日目 | 298.3 | 141.4 | 95.7 |
2日目 | 284.5 | 139.4 | 88.6 |
3日目 | 293.6 | 142.0 | 90.1 |
mean | 291.0 | 140.6 | 90.9 |
CV(%) | 1.8 | 0.8 | 3.1 |
ラット血清検体
測定日/検体 | 3 | 4 | 5 |
0日目 | 272.4 | 135.5 | 71.0 |
1日目 | 284.5 | 145.7 | 77.0 |
2日目 | 274.2 | 1363. | 74.7 |
3日目 | 277.0 | 135.9 | 79.5 |
mean | 277.0 | 138.4 | 75.5 |
CV(%) | 1.7 | 3.1 | 4.2 |
単位:mg/dL
添加回収試験
ヒト血清検体
添加量 | 測定値 | 回収量 | 回収率(%) |
― | 166.4 | ― | - |
47.6 | 219.1 | 52.6 | 110.6 |
99.7 | 276.2 | 109.7 | 110.0 |
150.4 | 326.3 | 159.9 | 106.3 |
201.3 | 378.3 | 211.9 | 105.2 |
マウス血清検体
添加量 | 測定値 | 回収量 | 回収率(%) |
― | 86.1 | - | - |
47.6 | 136.1 | 50.0 | 105.0 |
99.7 | 188.6 | 102.5 | 102.8 |
150.4 | 239.3 | 153.2 | 101.9 |
201.3 | 288.1 | 202.0 | 100.3 |
ラット血清検体
添加量 | 測定値 | 回収量 | 回収率(%) |
― | 69.9 | - | - |
47.6 | 121.5 | 51.6 | 108.3 |
99.7 | 161.8 | 91.9 | 92.1 |
150.4 | 220.8 | 150.8 | 100.3 |
201.3 | 276.8 | 206.9 | 102.7 |
単位:mg/dL
希釈直線性試験
測定範囲に入るよう付属の緩衝液で調製後、連続的に緩衝液で4段階希釈し測定した結果。
希釈直線性(ヒト血清検体と血漿検体)R2は0.9986と0.9945
希釈直線性(マウス血清検体と血漿検体)R2は0.9995と0.9980
希釈直線性(ラット血清検体と血漿検体)R2は0.9998と0.9988
検体測定例
ヒト検体
検体 | 測定値(mean) | SD | CV(%) |
プール血清 | 182.7 | 12.8 | 7.0 |
プール血漿(EDTA) | 143.2 | 0.02 | 0.0 |
マウス検体:CD-1(ICR)、血清
検体 | 測定値(mean) | SD | CV(%) |
No.1 | 92.4 | 4.31 | 4.7 |
No.2 | 84.9 | 0.58 | 0.7 |
No.3 | 69.8 | 1.71 | 2.5 |
No.4 | 77.3 | 5.22 | 6.8 |
No.5 | 65.8 | 1.45 | 2.2 |
マウス検体:CD-1(ICR)、血漿(ETDA)
検体 | 測定値(mean) | SD | CV(%) |
No.1 | 40.1 | 1.51 | 3.8 |
No.2 | 42.2 | 2.01 | 4.8 |
No.3 | 37.2 | 2.08 | 5.6 |
No.4 | 42.2 | 1.23 | 2.9 |
No.5 | 40.0 | 0.99 | 2.5 |
ラット検体:SD、血清
検体 | 測定値(mean) | SD | CV(%) |
No.1 | 63.6 | 5.03 | 7.9 |
No.2 | 86.8 | 3.12 | 3.6 |
No.3 | 85.8 | 7.00 | 8.2 |
No.4 | 77.2 | 6.88 | 8.9 |
No.5 | 91.6 | 3.24 | 3.5 |
ラット検体:SD、血漿(ETDA)
検体 | 測定値(mean) | SD | CV(%) |
No.1 | 40.8 | 3.03 | 7.4 |
No.2 | 56.8 | 3.56 | 6.3 |
No.3 | 48.7 | 3.38 | 6.9 |
No.4 | 42.7 | 3.58 | 8.4 |
No.5 | 61.5 | 3.15 | 5.1 |
単位:mg/dL, n=2
マイクロプレート法
テスト | スタンダード | ブランク | |
発色試薬 | 300 μL | 300 μL | 300 μL |
試料 | 検体 2 μL | 標準液 2 μL | ― |
よく混合し、37℃で5分間加温。ブランクを対照として検体及び標準液の吸光度を測定する。主波長600 nm/副波長700 nm |
用手法
テスト | スタンダード | ブランク | |
発色試薬 | 3.0 mL | 3.0 mL | 3.0 mL |
試料 | 検体 20 μL | 標準液 20 μL | ― |
よく混合し、37 ℃で5分間加温。ブランクを対照として検体及び標準液の吸光度を測定する。 比色計:600 nm のフィルター 分光光度計:主波長600 nm /副波長700 nm |
注:用手法で測定した場合、50 回用となります
LABCHO-M1 ラボアッセイ コレステロール
取扱説明書 / Package Insert SDS Japanese / English
ご使用者様からの情報をお待ちしております
酵素法測定試薬 ラボアッセイTM
ALP(用手法)
旧コード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量/測定回数 | 希望納入価格 (消費税別) |
LABALP-M1 633-51021 |
ラボアッセイTM ALP p-ニトロフェニルりん酸基質法によるアルカリフォスファターゼ活性測定キット |
0.0625~0.5 mmol/L | 20 μL/ 500回 | 21,000円 |
Ammonia(用手法)
旧コード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量/測定回数 | 希望納入価格 (消費税別) |
LABNH3-M1 633-51761 |
ラボアッセイTM Ammonia 藤井・奥田法変法 |
100~400 µg/dL | 50 μL/ 700回(マイクロプレート法) 500 μL/60回(用手法) |
28,600円 |
Creatinine(用手法)
旧コード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量/測定回数 | 希望納入価格 (消費税別) |
LABCREA-M1 636-51011 |
ラボアッセイTM Creatinine Jaffe法 |
2.5~10 mg/dL | 250μL/ 500回(マイクロプレート法) 500 μL/50回(用手法) |
28,000円 |
Cholesterol(用手法)
旧コード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量/測定回数 | 希望納入価格 (消費税別) |
LABCHO-M1 635-50981 |
ラボアッセイTM Cholesterol コレステロールオキシダーゼ・DAOS法 |
50~592.2 mg/dL | 2 μL/ 500回(マイクロプレート法) 20 μL/50回(用手法) |
21,000円 |
Glucose(用手法)
旧コード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量/測定回数 | 希望納入価格 (消費税別) |
LABGLUC-M1 638-50971 |
ラボアッセイTM Glucose ムタロターゼ・GOD法 |
50~500 mg/dL | 2 μL/ 500回(マイクロプレート法) 20 μL/50回(用手法) |
23,000円 |
NEFA(用手法)
旧コード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量/測定回数 | 希望納入価格 (消費税別) |
LABNEFA-M1 633-52001 |
ラボアッセイTM NEFA ACS・ACOD法 |
0.4~1.97 mEq/L | 4 μL/ 500回(マイクロプレート法) 50 μL/40回(用手法) |
40,000円 |
Phospholipid(用手法)
旧コード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量/測定回数 | 希望納入価格 (消費税別) |
LABPLIP-M1 639-51001 |
ラボアッセイTM Phospholipid コリンオキシダーゼ・DAOS法 |
75.0~596.1 mg/dL | 2 μL/ 500回(マイクロプレート法) 20 μL/50回(用手法) |
26,000円 |
Triglyceride(用手法)
旧コード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量/測定回数 | 希望納入価格 (消費税別) |
LABTRIG-M1 632-50991 |
ラボアッセイTM Triglyceride GPO・DAOS法 |
100~888 mg/dL | 2 μL/ 350回(マイクロプレート法) 20 μL/35回(用手法) |
23,000円 |
GLDH:Glutamate dehydrogenase (自動分析装置用試薬)
旧コード 和光コード |
品名 | 測定範囲 | 検体量/測定回数 | 希望納入価格 (消費税別) |
LABGLDH-RA 631-47771 |
ラボアッセイ GLDH-ラット(Aタイプ) | 1~200 U/L(*) | 15 μL/ 150回 (日立LAbOSPECT003の場合) |
35,000円 |
LABGLDH-RC 630-48581 |
ラボアッセイ GLDH-ラット用コントロール | 保存温度:-35℃以下 有効期限:6ヶ月 |
容量:500μL/1本 20本セット |
40,000円 |
*検量線範囲は100 U/Lまです。直線性は200 U/Lまで確認しています。