血清中のコレステロール濃度は、肝及び腸管におけるコレステロールの生成・吸収・異化や血中リポタンパク質代謝と密接に関係しています。
本品は、N-エチル-N-(2-ヒドロキシ-3-スルホプロピル)- 3, 5-ジメトキシアニリンナトリウム(DAOS)を利用した青色発色系の酵素法試薬です。
マイクロプレート法により、マウス血清中の総コレステロールの測定に用いることができます。
用手法での測定も可能であり、また、ヒト血清中の総コレステロールの定量を行うこともできます。
キットの構成
| 構 成 品 | 容 量 | |
| (1) 緩衝液 50 mmol/L MES | 150 mL／1 本 | |
| (2) 発色剤 | 150 mL用／1 本 |
|
| 溶解時 | ||
| コレステロールエステラーゼ | 1.6 units/mL | |
| コレステロールオキシダーゼ | 0.31 units/mL | |
| ペルオキシダーゼ（HRP） | 5.2 units/mL | |
| DAOS | 0.95 mmol/L | |
| 4-アミノアンチピリン | 0.19 mmol/L | |
| アスコルビン酸オキシダーゼ | 4.4 units/mL | |
| (3) 標準液 コレステロール 200 mg/dL | 5 mL／1 本 |
※マイクロプレート法の場合、測定回数は500回、用手法の場合、測定回数は50回
測定原理
検体に発色試薬を作用させると、検体中のコレステロールエステル類は、コレステロールエステラーゼにより遊離のコレステロールと脂肪酸に分解します。生成したコレステロールは、既存の遊離型コレステロールと共にコレステロールオキシダーゼにより酸化し、同時に過酸化水素を生じます。生成した過酸化水素は、ペルオキシダーゼ（HRP）の作用によりDAOS と4-アミノアンチピリンを定量的に酸化縮合させ、青色色素を生じさせます。この青色色素の吸光度を測定することにより、検体中の総コレステロール濃度を求めます。
全血／血清／血漿検体
･ 採取後の検体は速やかに測定してください。
･ 溶血はわずかに正誤差を与えます。
･アルコルビン酸、ビリルビンは測定値にほとんど影響を与えません。
測定範囲：50～592.2 mg/dL
●感度
･ 精製水を試料として測定した場合の吸光度は、0.11 以下です。
･ 特定濃度の基準液（コレステロール 200 mg/dL）を試料として測定した場合の吸光度は、0.13 ～ 0.65 です。
●特異性
･ 既知濃度の管理用血清を測定するとき、既知濃度の± 10 ％以内にあります。
精度試験（アッセイ内変動）
| ヒト血清検体 | 1 | 2 |
| 1 | 169.8 | 81.3 |
| 2 | 172.8 | 86.6 |
| 3 | 176.3 | 90.5 |
| 4 | 183.8 | 86.8 |
| 5 | 178.2 | 84.1 |
| 6 |
174.6 | 88.1 |
| mean | 175.9 | 86.2 |
| SD | 4.8 | 3.2 |
| CV(%) | 2.7 | 3.7 |
| マウス血清検体 | 1 | 2 |
| 1 | 146.3 | 97.3 |
| 2 | 143.1 | 95.9 |
| 3 | 139.5 | 92.4 |
| 4 | 138.8 | 85.8 |
| 5 | 137.4 | 90.3 |
| 6 |
139.8 | 86.6 |
| mean | 140.8 | 91.4 |
| SD | 3.3 | 4.7 |
| CV(%) | 2.3 | 5.2 |
| ラット血清検体 | 1 | 2 |
| 1 | 134.9 | 78.9 |
| 2 | 135.0 | 75.3 |
| 3 | 140.1 | 74.6 |
| 4 | 132.3 | 70.0 |
| 5 | 130.9 | 76.7 |
| 6 |
133.7 | 77.7 |
| mean | 134.5 | 75.5 |
| SD | 3.2 | 3.1 |
| CV(%) | 2.4 | 4.2 |
単位：mg/dL
再現性試験（アッセイ間変動）
ヒト血清検体
| 測定日/検体 | 3 | 4 | 5 |
| 0日目 | 371.1 | 173.8 | 79.8 |
| 1日目 | 390.5 | 181.0 | 81.4 |
| 2日目 | 380.4 | 176.9 | 79.0 |
| 3日目 | 385.8 | 180.2 | 85.2 |
| mean | 381.9 | 178.0 | 81.3 |
| CV(%) | 1.9 | 1.6 | 3.0 |
マウス血清検体
| 測定日/検体 | 3 | 4 | 5 |
| 0日目 | 287.6 | 139.7 | 89.1 |
| 1日目 | 298.3 | 141.4 | 95.7 |
| 2日目 | 284.5 | 139.4 | 88.6 |
| 3日目 | 293.6 | 142.0 | 90.1 |
| mean | 291.0 | 140.6 | 90.9 |
| CV(%) | 1.8 | 0.8 | 3.1 |
ラット血清検体
| 測定日/検体 | 3 | 4 | 5 |
| 0日目 | 272.4 | 135.5 | 71.0 |
| 1日目 | 284.5 | 145.7 | 77.0 |
| 2日目 | 274.2 | 1363. | 74.7 |
| 3日目 | 277.0 | 135.9 | 79.5 |
| mean | 277.0 | 138.4 | 75.5 |
| CV(%) | 1.7 | 3.1 | 4.2 |
単位：mg/dL
添加回収試験
ヒト血清検体
| 添加量 | 測定値 | 回収量 | 回収率(%) |
| ― | 166.4 | ― | － |
| 47.6 | 219.1 | 52.6 | 110.6 |
| 99.7 | 276.2 | 109.7 | 110.0 |
| 150.4 | 326.3 | 159.9 | 106.3 |
| 201.3 | 378.3 | 211.9 | 105.2 |
マウス血清検体
| 添加量 | 測定値 | 回収量 | 回収率(%) |
| ― | 86.1 | － | － |
| 47.6 | 136.1 | 50.0 | 105.0 |
| 99.7 | 188.6 | 102.5 | 102.8 |
| 150.4 | 239.3 | 153.2 | 101.9 |
| 201.3 | 288.1 | 202.0 | 100.3 |
ラット血清検体
| 添加量 | 測定値 | 回収量 | 回収率(%) |
| ― | 69.9 | － | － |
| 47.6 | 121.5 | 51.6 | 108.3 |
| 99.7 | 161.8 | 91.9 | 92.1 |
| 150.4 | 220.8 | 150.8 | 100.3 |
| 201.3 | 276.8 | 206.9 | 102.7 |
単位：mg/dL
希釈直線性試験
測定範囲に入るよう付属の緩衝液で調製後、連続的に緩衝液で4段階希釈し測定した結果。
希釈直線性（ヒト血清検体と血漿検体）R2は0.9986と0.9945
希釈直線性（マウス血清検体と血漿検体）R2は0.9995と0.9980
希釈直線性（ラット血清検体と血漿検体）R2は0.9998と0.9988
検体測定例
ヒト検体
| 検体 | 測定値（mean） | SD | CV(%) |
| プール血清 | 182.7 | 12.8 | 7.0 |
| プール血漿(EDTA) | 143.2 | 0.02 | 0.0 |
マウス検体：CD-1(ICR)、血清
| 検体 | 測定値（mean） | SD | CV(%) |
| No.1 | 92.4 | 4.31 | 4.7 |
| No.2 | 84.9 | 0.58 | 0.7 |
| No.3 | 69.8 | 1.71 | 2.5 |
| No.4 | 77.3 | 5.22 | 6.8 |
| No.5 | 65.8 | 1.45 | 2.2 |
マウス検体：CD-1(ICR)、血漿(ETDA)
| 検体 | 測定値（mean） | SD | CV(%) |
| No.1 | 40.1 | 1.51 | 3.8 |
| No.2 | 42.2 | 2.01 | 4.8 |
| No.3 | 37.2 | 2.08 | 5.6 |
| No.4 | 42.2 | 1.23 | 2.9 |
| No.5 | 40.0 | 0.99 | 2.5 |
ラット検体：SD、血清
| 検体 | 測定値（mean） | SD | CV(%) |
| No.1 | 63.6 | 5.03 | 7.9 |
| No.2 | 86.8 | 3.12 | 3.6 |
| No.3 | 85.8 | 7.00 | 8.2 |
| No.4 | 77.2 | 6.88 | 8.9 |
| No.5 | 91.6 | 3.24 | 3.5 |
ラット検体：SD、血漿(ETDA)
| 検体 | 測定値（mean） | SD | CV(%) |
| No.1 | 40.8 | 3.03 | 7.4 |
| No.2 | 56.8 | 3.56 | 6.3 |
| No.3 | 48.7 | 3.38 | 6.9 |
| No.4 | 42.7 | 3.58 | 8.4 |
| No.5 | 61.5 | 3.15 | 5.1 |
単位：mg/dL, n=2
マイクロプレート法
| テスト | スタンダード | ブランク | |
| 発色試薬 | 300 μL | 300 μL | 300 μL |
| 試料 | 検体 2 μL | 標準液 2 μL | ― |
| よく混合し、37℃で５分間加温。ブランクを対照として検体及び標準液の吸光度を測定する。主波長600 nm／副波長700 nm | |||
用手法
| テスト | スタンダード | ブランク | |
| 発色試薬 | 3.0 mL | 3.0 mL | 3.0 mL |
| 試料 | 検体 20 μL | 標準液 20 μL | ― |
|
よく混合し、37 ℃で５分間加温。ブランクを対照として検体及び標準液の吸光度を測定する。 比色計：600 nm のフィルター 分光光度計：主波長600 nm ／副波長700 nm |
|||
注：用手法で測定した場合、50 回用となります
LABCHO-M1 ラボアッセイ コレステロール
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酵素法測定試薬 ラボアッセイTM
ALP（用手法）
| シバヤギコード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量／測定回数 | 希望納入価格 （消費税別） |
| LABALP-M1 633-51021 |
ラボアッセイTM ALP p-ニトロフェニルりん酸基質法によるアルカリフォスファターゼ活性測定キット |
0.0625～0.5 mmol/L | 20 μL／ 500回 | 21,000円 |
Ammonia（用手法）
| シバヤギコード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量／測定回数 | 希望納入価格 （消費税別） |
| LABNH3-M1 633-51761 |
ラボアッセイTM Ammonia 藤井・奥田法変法 |
100～400 µg/dL | 50 μL／ 700回（マイクロプレート法） 500 μL／60回(用手法) |
28,600円 |
Cholesterol（用手法）
| シバヤギコード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量／測定回数 | 希望納入価格 （消費税別） |
| LABCHO-M1 635-50981 |
ラボアッセイTM Cholesterol コレステロールオキシダーゼ・DAOS法 |
50～592.2 mg/dL | 2 μL／ 500回（マイクロプレート法） 20 μL／50回(用手法) |
21,000円 |
Glucose（用手法）
| シバヤギコード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量／測定回数 | 希望納入価格 （消費税別） |
| LABGLUC-M1 638-50971 |
ラボアッセイTM Glucose ムタロターゼ・GOD法 |
50～500 mg/dL | 2 μL／ 500回(マイクロプレート法) 20 μL／50回(用手法) |
23,000円 |
NEFA（用手法）
| シバヤギコード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量／測定回数 | 希望納入価格 （消費税別） |
| LABNEFA-M1 633-52001 |
ラボアッセイTM NEFA ACS・ACOD法 |
0.4～1.97 mEq/L | 4 μL／ 500回（マイクロプレート法） 50 μL／40回（用手法） |
40,000円 |
Phospholipid（用手法）
| シバヤギコード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量／測定回数 | 希望納入価格 （消費税別） |
| LABPLIP-M1 639-51001 |
ラボアッセイTM Phospholipid コリンオキシダーゼ・DAOS法 |
75.0～596.1 mg/dL | 2 μL／ 500回（マイクロプレート法） 20 μL／50回（用手法） |
26,000円 |
Triglyceride（用手法）
| シバヤギコード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量／測定回数 | 希望納入価格 （消費税別） |
| LABTRIG-M1 632-50991 |
ラボアッセイTM Triglyceride GPO・DAOS法 |
100～888 mg/dL | 2 μL／ 350回(マイクロプレート法) 20 μL／35回(用手法) |
23,000円 |
GLDH:Glutamate dehydrogenase (自動分析装置用試薬)
| シバヤギコード 和光コード |
品名 | 測定範囲 | 検体量／測定回数 | 希望納入価格 （消費税別） |
| LABGLDH-RA 631-47771 |
ラボアッセイ GLDH-ラット(Aタイプ) | 1～200 U/L(*) | 15 μL／ 150回 (日立LAbOSPECT003の場合) |
35,000円 |
| LABGLDH-RC 630-48581 |
ラボアッセイ GLDH-ラット用コントロール | 保存温度：-35℃以下 有効期限：6ヶ月 |
容量：500μL/1本 20本セット |
40,000円 |
＊検量線範囲は100 U/Lまです。直線性は200 U/Lまで確認しています。