りん脂質は糖タンパク質、コレステロールやタンパク質と共に生体膜の主要な構成成分となる脂質です。本品はN-エチル-N-(2-ヒドロキシ-3-スルホプロピル)-3,5-ジメトキシアニリンナトリウム(DAOS)を利用した青色発色系の酵素法試薬です。マイクロプレート法により、マウス血清中のりん脂質量の測定に用いることができます。用手法での測定も可能であり、また、ヒト血清中のりん脂質の測定を行うこともできますが、体外診断用に用いることはできません。
キットの構成
| 構 成 品 | 容 量 | |
| (1) 緩衝液 50 mmol/L グッド緩衝液、pH7.5 | 50 mL／3 本 | |
| (2) 発色剤 | 50 mL用／3 本 |
|
| 溶解時 | ||
| ホスホリパーゼD | 0.47 units/mL | |
| コリンオキシダーゼ | 2.0 units/mL | |
| ペルオキシダーゼ | 4.2 units/mL | |
| N-エチル-N-(2-ヒドロキシ-3-スルホプロピル)-3,5-ジメトキシアニリンナトリウム(DAOS) | 0.77 mmol/L | |
| 4-アミノアンチピリン | 0.24 mmol/L | |
| アスコルビン酸オキシダーゼ | 3.9 units/mL | |
| (3) 標準液 塩化コリン（りん脂質 300 mg/dL相当） | 5 mL／1 本 |
※マイクロプレート法の場合、測定回数は500回、用手法の場合、測定回数は50回
測定原理
検体中のりん脂質（レシチン、リゾレシチン、スフィンゴミエリン）は、ホスホリパーゼD の作用により加水分解され、コリンを遊離します。生成したコリンは、コリンオキシダーゼの作用を受けてベタインに酸化され、同時に過酸化水素を生じます。生成した過酸化水素は、ペルオキシダーゼ（POD）の作用によりDAOS と4-アミノアンチピリンとを定量的に酸化縮合させ、青色の色素を生成させます。この青色色素の吸光度を測定することにより、検体中のりん脂質濃度を求めます。
全血／血清／血漿検体
･ 採取後の検体は速やかに測定してください。
･ アルコルビン酸、ビリルビン、溶血は測定値にほとんど影響を与えません。
･ 本法はりん脂質のうちレシチン、スフィンゴミエリン、リゾレシチンを測定しますがケファリンは測定しません。
･ 採血後すぐに測定するか、長期に保存する場合は－35 ℃以下で凍結保存してください。
測定範囲：75.0～596.1 mg/dL
●感度
･ 精製水を試料として測定した場合の吸光度は、0.14 以下です。
･ 特定濃度の基準液（りん脂質 300 mg/dL）を試料として測定した場合の吸光度は、0.12 ～ 0.58 です。
●特異性
･ 既知濃度の管理用血清を測定するとき、既知濃度の± 15 ％以内にあります。
精度試験（アッセイ内変動）
| ヒト血清検体 | 1 | 2 |
| 1 | 525.6 | 207.1 |
| 2 | 524.4 | 213.3 |
| 3 | 517.6 | 221.7 |
| 4 | 510.5 | 215.3 |
| 5 | 515.8 | 212.0 |
| 6 |
515.9 | 215.6 |
| mean | 518.3 | 214.2 |
| SD | 5.7 | 4.8 |
| CV(%) | 1.1 | 2.2 |
| マウス血清検体 | 1 | 2 |
| 1 | 591.8 | 279.0 |
| 2 | 582.4 | 285.1 |
| 3 | 573.8 | 286.4 |
| 4 | 583.5 | 287.9 |
| 5 | 592.2 | 266.0 |
| 6 |
592.3 | 270.2 |
| mean | 586.0 | 279.1 |
| SD | 7.5 | 9.1 |
| CV(%) | 1.3 | 3.3 |
| ラット血清検体 | 1 | 2 |
| 1 | 459.8 | 144.3 |
| 2 | 458.6 | 147.4 |
| 3 | 456.7 | 143.3 |
| 4 | 453.0 | 145.8 |
| 5 | 444.4 | 144.6 |
| 6 |
448.1 | 147.2 |
| mean | 453.4 | 145.4 |
| SD | 6.1 | 1.7 |
| CV(%) | 1.4 | 1.1 |
単位：mg/dL
再現性試験（アッセイ間変動）
ヒト血清検体
| 測定日/検体 | 3 | 4 | 5 |
| 0日目 | 525.7 | 367.4 | 219.0 |
| 1日目 | 493.1 | 356.7 | 201.9 |
| 2日目 | 511.7 | 363.8 | 205.9 |
| 3日目 | 500.8 | 360.1 | 223.9 |
| mean | 507.8 | 362.0 | 212.7 |
| CV(%) | 2.4 | 1.1 | 4.3 |
マウス血清検体
| 測定日/検体 | 3 | 4 | 5 |
| 0日目 | 589.3 | 432.8 | 285.0 |
| 1日目 | 564.5 | 409.9 | 256.6 |
| 2日目 | 565.0 | 410.3 | 253.1 |
| 3日目 | 569.4 | 416.1 | 284.5 |
| mean | 572.1 | 417.3 | 269.8 |
| CV(%) | 1.8 | 2.2 | 5.6 |
ラット血清検体
| 測定日/検体 | 3 | 4 | 5 |
| 0日目 | 461.8 | 297.6 | 143.8 |
| 1日目 | 431.8 | 283.1 | 139.4 |
| 2日目 | 449.2 | 296.9 | 141.8 |
| 3日目 | 435.9 | 296.7 | 142.3 |
| mean | 444.7 | 293.6 | 141.8 |
| CV(%) | 2.6 | 2.1 | 1.1 |
単位：mg/dL
添加回収試験
ヒト血清検体
| 添加量 | 測定値 | 回収量 | 回収率(%) |
| ― | 216.6 | ― | － |
| 152.4 | 361.6 | 145.0 | 95.2 |
| 204.2 | 412.4 | 195.8 | 95.9 |
| 262.3 | 462.8 | 246.2 | 93.9 |
| 314.2 | 521.9 | 305.3 | 97.1 |
ヒト血漿(EDTA)検体
| 添加量 | 測定値 | 回収量 | 回収率(%) |
| ― | 216.5 | ― | － |
| 152.4 | 359.7 | 143.2 | 94.0 |
| 204.2 | 403.5 | 187.0 | 91.6 |
| 262.3 | 466.6 | 250.1 | 95.3 |
| 314.2 | 533.5 | 317.0 | 100.9 |
マウス血清検体
| 添加量 | 測定値 | 回収量 | 回収率(%) |
| ― | 285.3 | － | － |
| 152.4 | 438.1 | 152.8 | 100.2 |
| 204.2 | 486.6 | 201.3 | 98.6 |
| 262.3 | 532.0 | 246.7 | 94.0 |
| 314.2 | 601.3 | 316.0 | 100.6 |
マウス血漿(EDTA)検体
| 添加量 | 測定値 | 回収量 | 回収率(%) |
| ― | 111.5 | － | － |
| 152.4 | 256.5 | 145.0 | 95.1 |
| 204.2 | 311.2 | 199.7 | 97.8 |
| 262.3 | 368.5 | 257.0 | 98.0 |
| 314.2 | 432.7 | 321.1 | 102.2 |
ラット血清検体
| 添加量 | 測定値 | 回収量 | 回収率(%) |
| ― | 138.1 | － | － |
| 152.4 | 291.0 | 152.9 | 100.3 |
| 204.2 | 345.1 | 207.0 | 101.4 |
| 262.3 | 395.4 | 257.3 | 98.1 |
| 314.2 | 459.1 | 321.6 | 102.3 |
ラット血漿(EDTA)検体
| 添加量 | 測定値 | 回収量 | 回収率(%) |
| ― | 97.8 | － | － |
| 152.4 | 246.3 | 148.5 | 97.4 |
| 204.2 | 298.6 | 200.8 | 98.3 |
| 262.3 | 352.3 | 254.5 | 97.0 |
| 314.2 | 422.5 | 324.7 | 103.3 |
単位：mg/dL
希釈直線性試験
測定範囲に入るよう付属の緩衝液で調製後、連続的に緩衝液で4段階希釈し測定した結果。
希釈直線性（ヒト血清検体と血漿検体）R2は0.9996と0.9989
希釈直線性（マウス血清検体と血漿検体）R2は0.9999と0.9996
希釈直線性（ラット血清検体と血漿検体）R2は0.9998と0.9996
希釈直線性（培地(50%)：D-MEM/10% Fetal Bovine Serum/1xPenicillin-Streptomycin Solution ）R2は0.9999
検体測定例
ヒト検体
| 検体 | 測定値（mean） | SD | CV(%) |
| プール血清 | 231.9 | 11.4 | 4.9 |
| プール血漿(EDTA) | 211.8 | 1.10 | 0.5 |
マウス検体：CD-1(ICR)、血清
| 検体 | 測定値（mean） | SD | CV(%) |
| No.1 | 241.0 | 1.60 | 0.7 |
| No.2 | 213.9 | 0.44 | 0.2 |
| No.3 | 183.1 | 3.30 | 1.8 |
| No.4 | 198.1 | 4.86 | 2.5 |
| No.5 | 171.0 | 5.97 | 3.5 |
マウス検体：CD-1(ICR)、血漿(ETDA)
| 検体 | 測定値（mean） | SD | CV(%) |
| No.1 | 111.4 | 4.45 | 4.0 |
| No.2 | 122.9 | 1.61 | 1.3 |
| No.3 | 103.4 | 5.15 | 5.0 |
| No.4 | 115.0 | 7.41 | 6.4 |
| No.5 | 134.8 | 0.58 | 0.4 |
ラット検体：SD、血清
| 検体 | 測定値（mean） | SD | CV(%) |
| No.1 | 134.6 | 4.28 | 3.2 |
| No.2 | 199.3 | 2.88 | 1.4 |
| No.3 | 168.5 | 1.62 | 1.0 |
| No.4 | 160.0 | 0.33 | 0.2 |
| No.5 | 163.5 | 3.52 | 2.2 |
ラット検体：SD、血漿(ETDA)
| 検体 | 測定値（mean） | SD | CV(%) |
| No.1 | 97.7 | 1.84 | 1.9 |
| No.2 | 122.8 | 5.82 | 4.7 |
| No.3 | 107.9 | 2.35 | 2.2 |
| No.4 | 116.0 | 7.50 | 6.5 |
| No.5 | 121.6 | 10.9 | 8.9 |
イヌ検体：ビーグル、血清
| 検体 | 測定値（mean） | SD | CV(%) |
| No.1 | 373.3 | 7.644 | 2.0 |
| No.2 | 274.1 | 9.740 | 3.6 |
| No.3 | 354.6 | 20.49 | 5.8 |
| No.4 | 287.8 | 0.263 | 0.1 |
| No.5 | 472.3 | 12.47 | 2.6 |
| No.6 | 303.3 | 3.058 | 1.0 |
| No.7 | 275.1 | 3.341 | 1.2 |
| No.8 | 277.8 | 1.4599 | 0.5 |
ネコ検体：Short hair、血清
| 検体 | 測定値（mean） | SD | CV(%) |
| No.1 | 245.6 | 0.799 | 0.3 |
| No.2 | 191.0 | 2.689 | 1.4 |
| No.3 | 238.2 | 1.885 | 0.8 |
| No.4 | 229.8 | 0.133 | 0.1 |
| No.5 | 227.0 | 0.376 | 0.2 |
| No.6 | 238.0 | 1.797 | 0.8 |
| No.7 | 302.3 | 2.927 | 1.0 |
| No.8 | 158.6 | 0.981 | 0.6 |
単位：mg/dL, n=2
マイクロプレート法
| テスト | スタンダード | ブランク | |
| 発色試薬 | 300 μL | 300 μL | 300 μL |
| 試料 | 検体 2 μL | 標準液 2 μL | ― |
| よく混合し、37℃で５分間加温。ブランクを対照として600 nmにおける検体及び標準液の吸光度を測定する。主波長600 nm／副波長700 nm | |||
用手法
| テスト | スタンダード | ブランク | |
| 発色試薬 | 3.0 mL | 3.0 mL | 3.0 mL |
| 試料 | 検体 20 μL | 標準液 20 μL | ― |
|
よく混合し、37 ℃で５分間加温。ブランクを対照として検体及び標準液の吸光度を測定する。 比色計：600 nm のフィルター 分光光度計：主波長600 nm ／副波長700 nm |
|||
注：用手法で測定した場合、50 回用となります
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酵素法測定試薬 ラボアッセイTM
ALP（用手法）
| シバヤギコード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量／測定回数 | 希望納入価格 （消費税別） |
| LABALP-M1 633-51021 |
ラボアッセイTM ALP p-ニトロフェニルりん酸基質法によるアルカリフォスファターゼ活性測定キット |
0.0625～0.5 mmol/L | 20 μL／ 500回 | 21,000円 |
Ammonia（用手法）
| シバヤギコード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量／測定回数 | 希望納入価格 （消費税別） |
| LABNH3-M1 633-51761 |
ラボアッセイTM Ammonia 藤井・奥田法変法 |
100～400 µg/dL | 50 μL／ 700回（マイクロプレート法） 500 μL／60回(用手法) |
28,600円 |
Creatinine（用手法）
| シバヤギコード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量／測定回数 | 希望納入価格 （消費税別） |
| LABCREA-M1 636-51011 |
ラボアッセイTM Creatinine Jaffe法 |
2.5～10 mg/dL | 250μL／ 500回（マイクロプレート法） 500 μL／50回(用手法) |
28,000円 |
Cholesterol（用手法）
| シバヤギコード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量／測定回数 | 希望納入価格 （消費税別） |
| LABCHO-M1 635-50981 |
ラボアッセイTM Cholesterol コレステロールオキシダーゼ・DAOS法 |
50～592.2 mg/dL | 2 μL／ 500回（マイクロプレート法） 20 μL／50回(用手法) |
21,000円 |
Glucose（用手法）
| シバヤギコード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量／測定回数 | 希望納入価格 （消費税別） |
| LABGLUC-M1 638-50971 |
ラボアッセイTM Glucose ムタロターゼ・GOD法 |
50～500 mg/dL | 2 μL／ 500回(マイクロプレート法) 20 μL／50回(用手法) |
23,000円 |
NEFA（用手法）
| シバヤギコード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量／測定回数 | 希望納入価格 （消費税別） |
| LABNEFA-M1 633-52001 |
ラボアッセイTM NEFA ACS・ACOD法 |
0.4～1.97 mEq/L | 4 μL／ 500回（マイクロプレート法） 50 μL／40回（用手法） |
40,000円 |
Phospholipid（用手法）
| シバヤギコード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量／測定回数 | 希望納入価格 （消費税別） |
| LABPLIP-M1 639-51001 |
ラボアッセイTM Phospholipid コリンオキシダーゼ・DAOS法 |
75.0～596.1 mg/dL | 2 μL／ 500回(マイクロプレート法) 20 μL／50回(用手法) |
26,000円 |
Triglyceride（用手法）
| シバヤギコード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量／測定回数 | 希望納入価格 （消費税別） |
| LABTRIG-M1 632-50991 |
ラボアッセイTM Triglyceride GPO・DAOS法 |
100～888 mg/dL | 2 μL／ 350回(マイクロプレート法) 20 μL／35回(用手法) |
23,000円 |
GLDH:Glutamate dehydrogenase (自動分析装置用試薬)
| シバヤギコード 和光コード |
品名 | 測定範囲 | 検体量／測定回数 | 希望納入価格 （消費税別） |
| LABGLDH-RA 631-47771 |
ラボアッセイ GLDH-ラット(Aタイプ) | 1～200 U/L(*) | 15 μL／ 150回 (日立LAbOSPECT003の場合) |
35,000円 |
| LABGLDH-RC 630-48581 |
ラボアッセイ GLDH-ラット用コントロール | 保存温度：-35℃以下 有効期限：6ヶ月 |
容量：500μL/1本 20本セット |
40,000円 |
＊検量線範囲は100 U/Lまです。直線性は200 U/Lまで確認しています。