りん脂質は糖タンパク質、コレステロールやタンパク質と共に生体膜の主要な構成成分となる脂質です。本品はN-エチル-N-(2-ヒドロキシ-3-スルホプロピル)-3,5-ジメトキシアニリンナトリウム(DAOS)を利用した青色発色系の酵素法試薬です。マイクロプレート法により、マウス血清中のりん脂質量の測定に用いることができます。用手法での測定も可能であり、また、ヒト血清中のりん脂質の測定を行うこともできますが、体外診断用に用いることはできません。
キットの構成
構 成 品 | 容 量 | |
(1) 緩衝液 50 mmol/L グッド緩衝液、pH7.5 | 50 mL/3 本 | |
(2) 発色剤 | 50 mL用/3 本 |
|
溶解時 | ||
ホスホリパーゼD | 0.47 units/mL | |
コリンオキシダーゼ | 2.0 units/mL | |
ペルオキシダーゼ | 4.2 units/mL | |
N-エチル-N-(2-ヒドロキシ-3-スルホプロピル)-3,5-ジメトキシアニリンナトリウム(DAOS) | 0.77 mmol/L | |
4-アミノアンチピリン | 0.24 mmol/L | |
アスコルビン酸オキシダーゼ | 3.9 units/mL | |
(3) 標準液 塩化コリン(りん脂質 300 mg/dL相当) | 5 mL/1 本 |
※マイクロプレート法の場合、測定回数は500回、用手法の場合、測定回数は50回
測定原理
検体中のりん脂質(レシチン、リゾレシチン、スフィンゴミエリン)は、ホスホリパーゼD の作用により加水分解され、コリンを遊離します。生成したコリンは、コリンオキシダーゼの作用を受けてベタインに酸化され、同時に過酸化水素を生じます。生成した過酸化水素は、ペルオキシダーゼ(POD)の作用によりDAOS と4-アミノアンチピリンとを定量的に酸化縮合させ、青色の色素を生成させます。この青色色素の吸光度を測定することにより、検体中のりん脂質濃度を求めます。
全血/血清/血漿検体
・ 採取後の検体は速やかに測定してください。
・ アルコルビン酸、ビリルビン、溶血は測定値にほとんど影響を与えません。
・ 本法はりん脂質のうちレシチン、スフィンゴミエリン、リゾレシチンを測定しますがケファリンは測定しません。
・ 採血後すぐに測定するか、長期に保存する場合は-35 ℃以下で凍結保存してください。
測定範囲:75.0~596.1 mg/dL
●感度
・ 精製水を試料として測定した場合の吸光度は、0.14 以下です。
・ 特定濃度の基準液(りん脂質 300 mg/dL)を試料として測定した場合の吸光度は、0.12 ~ 0.58 です。
●特異性
・ 既知濃度の管理用血清を測定するとき、既知濃度の± 15 %以内にあります。
精度試験(アッセイ内変動)
ヒト血清検体 | 1 | 2 |
1 | 525.6 | 207.1 |
2 | 524.4 | 213.3 |
3 | 517.6 | 221.7 |
4 | 510.5 | 215.3 |
5 | 515.8 | 212.0 |
6 |
515.9 | 215.6 |
mean | 518.3 | 214.2 |
SD | 5.7 | 4.8 |
CV(%) | 1.1 | 2.2 |
マウス血清検体 | 1 | 2 |
1 | 591.8 | 279.0 |
2 | 582.4 | 285.1 |
3 | 573.8 | 286.4 |
4 | 583.5 | 287.9 |
5 | 592.2 | 266.0 |
6 |
592.3 | 270.2 |
mean | 586.0 | 279.1 |
SD | 7.5 | 9.1 |
CV(%) | 1.3 | 3.3 |
ラット血清検体 | 1 | 2 |
1 | 459.8 | 144.3 |
2 | 458.6 | 147.4 |
3 | 456.7 | 143.3 |
4 | 453.0 | 145.8 |
5 | 444.4 | 144.6 |
6 |
448.1 | 147.2 |
mean | 453.4 | 145.4 |
SD | 6.1 | 1.7 |
CV(%) | 1.4 | 1.1 |
単位:mg/dL
再現性試験(アッセイ間変動)
ヒト血清検体
測定日/検体 | 3 | 4 | 5 |
0日目 | 525.7 | 367.4 | 219.0 |
1日目 | 493.1 | 356.7 | 201.9 |
2日目 | 511.7 | 363.8 | 205.9 |
3日目 | 500.8 | 360.1 | 223.9 |
mean | 507.8 | 362.0 | 212.7 |
CV(%) | 2.4 | 1.1 | 4.3 |
マウス血清検体
測定日/検体 | 3 | 4 | 5 |
0日目 | 589.3 | 432.8 | 285.0 |
1日目 | 564.5 | 409.9 | 256.6 |
2日目 | 565.0 | 410.3 | 253.1 |
3日目 | 569.4 | 416.1 | 284.5 |
mean | 572.1 | 417.3 | 269.8 |
CV(%) | 1.8 | 2.2 | 5.6 |
ラット血清検体
測定日/検体 | 3 | 4 | 5 |
0日目 | 461.8 | 297.6 | 143.8 |
1日目 | 431.8 | 283.1 | 139.4 |
2日目 | 449.2 | 296.9 | 141.8 |
3日目 | 435.9 | 296.7 | 142.3 |
mean | 444.7 | 293.6 | 141.8 |
CV(%) | 2.6 | 2.1 | 1.1 |
単位:mg/dL
添加回収試験
ヒト血清検体
添加量 | 測定値 | 回収量 | 回収率(%) |
― | 216.6 | ― | - |
152.4 | 361.6 | 145.0 | 95.2 |
204.2 | 412.4 | 195.8 | 95.9 |
262.3 | 462.8 | 246.2 | 93.9 |
314.2 | 521.9 | 305.3 | 97.1 |
ヒト血漿(EDTA)検体
添加量 | 測定値 | 回収量 | 回収率(%) |
― | 216.5 | ― | - |
152.4 | 359.7 | 143.2 | 94.0 |
204.2 | 403.5 | 187.0 | 91.6 |
262.3 | 466.6 | 250.1 | 95.3 |
314.2 | 533.5 | 317.0 | 100.9 |
マウス血清検体
添加量 | 測定値 | 回収量 | 回収率(%) |
― | 285.3 | - | - |
152.4 | 438.1 | 152.8 | 100.2 |
204.2 | 486.6 | 201.3 | 98.6 |
262.3 | 532.0 | 246.7 | 94.0 |
314.2 | 601.3 | 316.0 | 100.6 |
マウス血漿(EDTA)検体
添加量 | 測定値 | 回収量 | 回収率(%) |
― | 111.5 | - | - |
152.4 | 256.5 | 145.0 | 95.1 |
204.2 | 311.2 | 199.7 | 97.8 |
262.3 | 368.5 | 257.0 | 98.0 |
314.2 | 432.7 | 321.1 | 102.2 |
ラット血清検体
添加量 | 測定値 | 回収量 | 回収率(%) |
― | 138.1 | - | - |
152.4 | 291.0 | 152.9 | 100.3 |
204.2 | 345.1 | 207.0 | 101.4 |
262.3 | 395.4 | 257.3 | 98.1 |
314.2 | 459.1 | 321.6 | 102.3 |
ラット血漿(EDTA)検体
添加量 | 測定値 | 回収量 | 回収率(%) |
― | 97.8 | - | - |
152.4 | 246.3 | 148.5 | 97.4 |
204.2 | 298.6 | 200.8 | 98.3 |
262.3 | 352.3 | 254.5 | 97.0 |
314.2 | 422.5 | 324.7 | 103.3 |
単位:mg/dL
希釈直線性試験
測定範囲に入るよう付属の緩衝液で調製後、連続的に緩衝液で4段階希釈し測定した結果。
希釈直線性(ヒト血清検体と血漿検体)R2は0.9996と0.9989
希釈直線性(マウス血清検体と血漿検体)R2は0.9999と0.9996
希釈直線性(ラット血清検体と血漿検体)R2は0.9998と0.9996
希釈直線性(培地(50%):D-MEM/10% Fetal Bovine Serum/1xPenicillin-Streptomycin Solution )R2は0.9999
検体測定例
ヒト検体
検体 | 測定値(mean) | SD | CV(%) |
プール血清 | 231.9 | 11.4 | 4.9 |
プール血漿(EDTA) | 211.8 | 1.10 | 0.5 |
マウス検体:CD-1(ICR)、血清
検体 | 測定値(mean) | SD | CV(%) |
No.1 | 241.0 | 1.60 | 0.7 |
No.2 | 213.9 | 0.44 | 0.2 |
No.3 | 183.1 | 3.30 | 1.8 |
No.4 | 198.1 | 4.86 | 2.5 |
No.5 | 171.0 | 5.97 | 3.5 |
マウス検体:CD-1(ICR)、血漿(ETDA)
検体 | 測定値(mean) | SD | CV(%) |
No.1 | 111.4 | 4.45 | 4.0 |
No.2 | 122.9 | 1.61 | 1.3 |
No.3 | 103.4 | 5.15 | 5.0 |
No.4 | 115.0 | 7.41 | 6.4 |
No.5 | 134.8 | 0.58 | 0.4 |
ラット検体:SD、血清
検体 | 測定値(mean) | SD | CV(%) |
No.1 | 134.6 | 4.28 | 3.2 |
No.2 | 199.3 | 2.88 | 1.4 |
No.3 | 168.5 | 1.62 | 1.0 |
No.4 | 160.0 | 0.33 | 0.2 |
No.5 | 163.5 | 3.52 | 2.2 |
ラット検体:SD、血漿(ETDA)
検体 | 測定値(mean) | SD | CV(%) |
No.1 | 97.7 | 1.84 | 1.9 |
No.2 | 122.8 | 5.82 | 4.7 |
No.3 | 107.9 | 2.35 | 2.2 |
No.4 | 116.0 | 7.50 | 6.5 |
No.5 | 121.6 | 10.9 | 8.9 |
イヌ検体:ビーグル、血清
検体 | 測定値(mean) | SD | CV(%) |
No.1 | 373.3 | 7.644 | 2.0 |
No.2 | 274.1 | 9.740 | 3.6 |
No.3 | 354.6 | 20.49 | 5.8 |
No.4 | 287.8 | 0.263 | 0.1 |
No.5 | 472.3 | 12.47 | 2.6 |
No.6 | 303.3 | 3.058 | 1.0 |
No.7 | 275.1 | 3.341 | 1.2 |
No.8 | 277.8 | 1.4599 | 0.5 |
ネコ検体:Short hair、血清
検体 | 測定値(mean) | SD | CV(%) |
No.1 | 245.6 | 0.799 | 0.3 |
No.2 | 191.0 | 2.689 | 1.4 |
No.3 | 238.2 | 1.885 | 0.8 |
No.4 | 229.8 | 0.133 | 0.1 |
No.5 | 227.0 | 0.376 | 0.2 |
No.6 | 238.0 | 1.797 | 0.8 |
No.7 | 302.3 | 2.927 | 1.0 |
No.8 | 158.6 | 0.981 | 0.6 |
単位:mg/dL, n=2
マイクロプレート法
テスト | スタンダード | ブランク | |
発色試薬 | 300 μL | 300 μL | 300 μL |
試料 | 検体 2 μL | 標準液 2 μL | ― |
よく混合し、37℃で5分間加温。ブランクを対照として600 nmにおける検体及び標準液の吸光度を測定する。主波長600 nm/副波長700 nm |
用手法
テスト | スタンダード | ブランク | |
発色試薬 | 3.0 mL | 3.0 mL | 3.0 mL |
試料 | 検体 20 μL | 標準液 20 μL | ― |
よく混合し、37 ℃で5分間加温。ブランクを対照として検体及び標準液の吸光度を測定する。 比色計:600 nm のフィルター 分光光度計:主波長600 nm /副波長700 nm |
注:用手法で測定した場合、50 回用となります
LABPLIP-M1 ラボアッセイ りん脂質
取扱説明書 / Package Insert SDS Japanese / English
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酵素法測定試薬 ラボアッセイTM
ALP(用手法)
旧コード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量/測定回数 | 希望納入価格 (消費税別) |
LABALP-M1 633-51021 |
ラボアッセイTM ALP p-ニトロフェニルりん酸基質法によるアルカリフォスファターゼ活性測定キット |
0.0625~0.5 mmol/L | 20 μL/ 500回 | 21,000円 |
Ammonia(用手法)
旧コード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量/測定回数 | 希望納入価格 (消費税別) |
LABNH3-M1 633-51761 |
ラボアッセイTM Ammonia 藤井・奥田法変法 |
100~400 µg/dL | 50 μL/ 700回(マイクロプレート法) 500 μL/60回(用手法) |
28,600円 |
Creatinine(用手法)
旧コード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量/測定回数 | 希望納入価格 (消費税別) |
LABCREA-M1 636-51011 |
ラボアッセイTM Creatinine Jaffe法 |
2.5~10 mg/dL | 250μL/ 500回(マイクロプレート法) 500 μL/50回(用手法) |
28,000円 |
Cholesterol(用手法)
旧コード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量/測定回数 | 希望納入価格 (消費税別) |
LABCHO-M1 635-50981 |
ラボアッセイTM Cholesterol コレステロールオキシダーゼ・DAOS法 |
50~592.2 mg/dL | 2 μL/ 500回(マイクロプレート法) 20 μL/50回(用手法) |
21,000円 |
Glucose(用手法)
旧コード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量/測定回数 | 希望納入価格 (消費税別) |
LABGLUC-M1 638-50971 |
ラボアッセイTM Glucose ムタロターゼ・GOD法 |
50~500 mg/dL | 2 μL/ 500回(マイクロプレート法) 20 μL/50回(用手法) |
23,000円 |
NEFA(用手法)
旧コード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量/測定回数 | 希望納入価格 (消費税別) |
LABNEFA-M1 633-52001 |
ラボアッセイTM NEFA ACS・ACOD法 |
0.4~1.97 mEq/L | 4 μL/ 500回(マイクロプレート法) 50 μL/40回(用手法) |
40,000円 |
Phospholipid(用手法)
旧コード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量/測定回数 | 希望納入価格 (消費税別) |
LABPLIP-M1 639-51001 |
ラボアッセイTM Phospholipid コリンオキシダーゼ・DAOS法 |
75.0~596.1 mg/dL | 2 μL/ 500回(マイクロプレート法) 20 μL/50回(用手法) |
26,000円 |
Triglyceride(用手法)
旧コード 和光コード |
品名 | 検量線範囲 | 検体量/測定回数 | 希望納入価格 (消費税別) |
LABTRIG-M1 632-50991 |
ラボアッセイTM Triglyceride GPO・DAOS法 |
100~888 mg/dL | 2 μL/ 350回(マイクロプレート法) 20 μL/35回(用手法) |
23,000円 |
GLDH:Glutamate dehydrogenase (自動分析装置用試薬)
旧コード 和光コード |
品名 | 測定範囲 | 検体量/測定回数 | 希望納入価格 (消費税別) |
LABGLDH-RA 631-47771 |
ラボアッセイ GLDH-ラット(Aタイプ) | 1~200 U/L(*) | 15 μL/ 150回 (日立LAbOSPECT003の場合) |
35,000円 |
LABGLDH-RC 630-48581 |
ラボアッセイ GLDH-ラット用コントロール | 保存温度:-35℃以下 有効期限:6ヶ月 |
容量:500μL/1本 20本セット |
40,000円 |
*検量線範囲は100 U/Lまです。直線性は200 U/Lまで確認しています。